ELISA方法實(shí)驗常會(huì )出現一些結果不好的現象，深圳子科生物技術(shù)部總結了常見(jiàn)的幾大類(lèi)問(wèn)題和對應的解決方案，具體如下：
一、ELISA實(shí)驗結果顯色淡、 靈敏度偏低
可能原因與具體解決辦法如下：
1、試劑盒在運輸途中時(shí)間太長(cháng)，溫度太高
解決辦法：盡量縮短運輸時(shí)間，夏季應放冰塊降溫

2、試劑盒未充分平衡
解決辦法：試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開(kāi)盒蓋，于室溫平衡至少
20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃） 。

3、培養箱溫度不足37℃
解決辦法：注意培養箱溫度，放入反應板后盡量減少開(kāi)啟次數以免
影響溫度恒定，非隔水式培養箱尤其應注意

4、保溫時(shí)間不足
解決辦法：校正定時(shí)鐘準確定時(shí)

5、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(cháng)、洗滌次數增加
解決辦法：按說(shuō)明書(shū)要求保留洗滌時(shí)間，準確記住洗滌次數

6、移液器吸液量不足，吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔
解決辦法：校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時(shí)要緊密，吸嘴內壁
要清潔，最好一次性使用

7、蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題
解決辦法：使用新鮮合格的蒸餾水

8、底物作用時(shí)間不足
解決辦法：準確定時(shí)

二、背景深全部呈有色
可能原因與具體解決辦法如下：

1、洗滌不充分，洗后未拍干，樣品中其它成分殘留或酶標記物殘留
解決辦法：
濃縮洗液準確配制；10倍濃縮洗滌液如有結晶則應讓結晶于室溫全部溶解后再量取稀釋?zhuān)怀浞窒礈?，徹底拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應棄去不用，不要反復使用，否則易造成污染

2、樣品污染
解決辦法：
樣品應新鮮采集，或低溫保存，防止污染

3、培養箱溫度超過(guò)37℃或反應時(shí)間過(guò)長(cháng)
解決辦法：調整培養箱溫度，準確定時(shí)

4、吸嘴重復使用，未洗凈或消毒不徹底
解決辦法：吸嘴盡可能一次性使用

5、蒸餾水被污染
解決辦法：使用新鮮蒸餾水

6、酶等試劑混用
解決辦法：不同批號試劑勿混用

7、一次實(shí)驗的標本量過(guò)多，加樣時(shí)間太長(cháng)， 導致實(shí)際反應時(shí)間延長(cháng)
解決辦法：合理安排實(shí)驗，避免幾塊酶標板同時(shí)加樣

三、重復性不佳
1、樣品數量多少不一，加樣時(shí)間有長(cháng)有短    
解決辦法：重復某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與第一次接近

2、保溫時(shí)間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致
解決辦法：重復測定標本，操作條件、人員等應盡可能與上次保持
一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性

3、加樣量不一致    
解決辦法： 樣品稀釋前應充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴

四、出現白板陽(yáng)性對照不顯色

1、顯色液變質(zhì)    
解決辦法：更換新的顯色液

2、洗滌液配制有誤  
解決辦法： 請按說(shuō)明書(shū)所示稀釋倍數配制

3未加酶結合物而認為已加入  
解決辦法： 注意不要漏加

4、終止液誤作洗滌液稀釋或當底物液使用  
解決辦法： 每次加液前均應看清標簽。

深圳子科生物專(zhuān)業(yè)研發(fā)生產(chǎn)ELISA試劑盒，如您購買(mǎi)我公司試劑盒后在實(shí)驗過(guò)程中，遇到任何解決不了的問(wèn)題，都可以隨時(shí)電話(huà)反饋到我們技術(shù)部，我們將第一時(shí)間幫您解決，助您售后無(wú)憂(yōu)!